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全自动核酸提取仪价格

核酸提取仪多少钱一台?自动核酸提取仪哪家好,报价多少,配套试剂单个成本多少呢?全自动核酸提取仪价格

分子生物学实验中 qPCR、分子克隆、下一代测序等都需要进行DNA提取。

全自动核酸提取仪价格-帝弘科技有限公司

如今,大多数实验室都使用商业 DNA 提取试剂盒,这些试剂盒使用硅胶自旋过滤法来获得高质量的 DNA。这些可以快速有效地纯化 DNA(或 RNA),在这里需要先了解一下DNA 提取试剂盒的工作原理。

核酸提取试剂盒的工作原理

离心柱包含一种硅胶树脂,可根据盐条件和受提取方法影响的其他因素选择性地结合 DNA 和 RNA。这些 DNA 提取试剂盒使整个过程比旧的 DNA 分离方法更容易、更快。但是,使用套件的缺点是,如果您不了解套件的黑匣子中的内容,则会使故障排除变得更加困难。
RNA和DNA提取

裂解:裂解公式可能因您要提取 DNA 还是 RNA 而异,但共同点是含有高浓度离液盐的裂解缓冲液。

Chaotropes(离液剂)的作用:Chaotrope会破坏氢键及疏水间的相互作用。离液盐包括盐酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸锂。

洗涤剂:除了离液剂外,裂解缓冲液中通常还有一些去污剂,以帮助蛋白质溶解和裂解。

溶菌酶和蛋白酶K:根据样品类型,也可以使用酶进行裂解。蛋白酶 K 就是其中之一,实际上在这些变性缓冲液中效果较好;当蛋白质变性增多,蛋白酶 K 的作用也会相应增强。然而,溶菌酶在变性中不起作用,因此溶菌酶处理通常在添加变性盐之前进行。

关于质粒制备的注意事项

分离质粒 DNA 与提取 RNA 或基因组 DNA 的提取方式是不相同的,因为必须质粒与基因组 DNA 必须分离。如果此刻,您加入离液剂将立即释放所有物质,并且无法将小环状 DNA 与高分子量染色体区别开来。因此,在质粒制备过程中中,直到裂解后才加入离液剂,盐用于结合。

DNA 提取后纯化:将 DNA 与色谱柱结合

离液盐对于裂解至关重要,而且对于将 DNA(或 RNA)与色谱柱结合也是如此。此外,为了增强和影响核酸与二氧化硅的结合,还添加了酒精。

大多数情况下这是乙醇,但有时可能是异丙醇。乙醇百分比和体积有很大的影响。太多,你会带入大量降解的核酸和小物种,这会影响 A260 读数并降低你的一些产量。太少,可能难以从膜上洗掉所有盐分。

如果您在裂解中使用含有 SDS 的去污剂,请尝试使用NaCl 作为沉淀剂,以避免去污剂污染 DNA 或 RNA。

洗涤 DNA(或 RNA)

当裂解物通过硅胶膜进行离心分离,现在所提取的 DNA 或 RNA 应该与柱子结合,杂质、细胞蛋白和多糖应该已经通过了。
但是,膜仍然被残留的细胞蛋白质和盐弄脏。如果样品来自植物,仍然会有多糖,也许一些色素留在膜上,或者如果样品是血液,膜可能会被染成棕色或黄色。

通过洗涤的方法去除杂质

通常有两次洗涤,尽管这可能因样品类型而异。初次洗涤通常会含有少量的离液盐,以去除蛋白质和有色污染物。 这之后总是用乙醇洗涤以除去盐。

如果开始的准备工作没有大量蛋白质,例如质粒准备或 PCR 清理,则只需要乙醇洗涤。去除离液盐对于获得高产量和高纯度的 DNA 或 RNA 至关重要。一些试剂盒甚至会用乙醇清洗柱子两次。

如果残留盐分,核酸的洗脱会很差,A230读数会很高,导致260/230的比率很低。对于无乙醇 DNA 和 RNA,需要进行干法离心,乙醇洗涤后,大多数方案都有一个离心步骤来干燥柱子。这是为了去除乙醇,对于清洁的洗脱液是必要的。

当将 10 mM Tris 缓冲液或水应用于膜进行洗脱时,核酸会水合并从膜中释放出来。如果色谱柱上仍有乙醇,则核酸无法再与水融合。如果跳过干燥步骤会导致乙醇污染和低产量。很可能在 Nanodrop 上看不到乙醇吸光度,所以它不会出现在您的读数中。

RNA 和 DNA 提取:洗脱法

DNA 提取方案的还剩余IDE步骤步就是从硅胶中释放纯 DNA 或 RNA。

对于 DNA 制备,通常使用 pH 值为 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱碱性 pH 值下更稳定,在缓冲液中溶解得更快。即使对于 DNA 颗粒也是如此。水的 pH 值往往较低,低至 4-5,并且高分子量 DNA 在用于洗脱的短时间内可能无法再与水结合。

通过在离心前让缓冲液在膜中停留几分钟,可以较大限度地洗脱 DNA。

由于RNA 易溶于水,且RNA 利于处在微酸性的 pH 值环境下。

苏州阿尔法生物提供PCR仪、均质仪、质粒取试剂盒、DNA提取试剂盒、血液基因组提取试剂盒、RNA提取试剂盒等广泛应用于分子生物学。

核酸提取仪分类:

1. 根据仪器型号大小不同划分

1) 自动液体工作站

自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。

2) 小型自动核酸提取仪

小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用。

2. 根据提取原理不同划分

1) 采用离心柱法的仪器

离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在1-12个样本,操作时间和手工提取差不多,并不能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。

2) 采用磁珠法的仪器

以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性,所以可设计成很多种通量,既可以单管提取,也可以提取8-96个样本,且其操作简单快捷,提取96个样本仅需30-45min,大大提高了实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。

磁珠法核酸提取仪的基本原理

磁珠法核酸提取仪一般分为抽吸法和磁棒法两种:

1. 抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:

1) 裂解:在样品中加入裂解液,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,细胞裂解,释放核酸。

2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。

3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。

4) 洗脱:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的核酸即与磁珠分离,从而得到纯化的核酸。

磁珠法分离原理

2. 磁棒法

磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现核酸的分离,原理和过程与抽吸法的一样,不同的是磁珠和液体分离的方式。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现核酸的提取。

磁珠法核酸提取仪的特点

1. 能够实现自动化、高通量操作。

2. 操作简单、快速。

3. 安全环保。

4. 高纯度,高得率。

5. 无污染,且结果稳定。

6. 成本低廉,便于广泛应用。

7. 可以同时处理不同类型的样本。

注意事项:

1. 仪器的安装环境:正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃、相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下。

2. 避免将仪器放置在靠近热源的地方,如电暖炉;同时为防止电子元件的短路,应避免水或者其他液体溅入其中。

3. 进风口和排风口均位于仪器背面,同时避免灰尘或纤维在进风口聚集,保持风道的畅通。

4. 核酸提取仪离其他竖直面至少10cm,

5. 仪器接地:为了避免触电事故,仪器的输入电源线必须接地。

6. 远离带电电路:操作人员不得擅自拆解仪器,更换元件或进行机内调节必须有持证的专业维修人员完成,不要在接通电源的情况下更换元件。

四种核酸自动提取仪的比较

科邦实验室可提供服务包括但不限于以上仪器,耗材试剂仪器定制加工系统集成应有尽有

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